YMC 公司的高液相色譜柱YMC-Pack系列色譜柱在制造過程中進行了嚴格的質(zhì)量管理,保證能為客戶提供有品質(zhì)的產(chǎn)品。為了使供給您的色譜柱大地發(fā)揮其性能并能夠長時間地被正確使用,請認真閱讀使用說明書。
1.色譜柱的連接規(guī)格
色譜柱型號末尾為「PTH」的為Parker 型;「WT」為Waters 型。
2.出廠時柱內(nèi)的保存溶劑
記載在產(chǎn)品盒內(nèi)的附件COLUMN INSPECTION REPORT(檢測報告)上,如需長期保存,請置換為此溶劑。如使用的洗脫液中含有緩沖液或鹽類,請注意置換順序以免鹽析出。
3.洗脫溶劑
? 從水溶性溶劑到非水溶性溶劑均可使用,但在極性*端不同的溶劑之間進行反復置換,可能會造成分析柱性能降低。通常可以使用的有機溶劑為乙腈、甲醇、四氫呋喃(THF)等。在使用THF 時,請注意PEEK 管等的耐溶劑性。
? 使用時請按照色譜柱標簽上的箭頭方向進行通液操作。
? 如需置換流動相,請注意有機溶劑間的互溶性和鹽的析出問題。另外,為避免樣品及樣品溶解溶劑中所含鹽物質(zhì)在色譜柱內(nèi)析出,請注意確認其在洗脫液中的溶解性。
? 流動相的pH 值請調(diào)制在2.0 到7.5 之間。注意:PROTEIN-RP 柱可在1.5 到7.5 的范圍中使用。
? 在pH 值臨界點附近使用時,請使用含有10%以上有機溶劑的流動相。在pH 值臨界點附近,會有因溫度、流動相組成等條件的影響而造成色譜柱壽命縮短的現(xiàn)象發(fā)生。
YMC-Pack CN
? CN 柱在正相、反相兩種模式上都可使用。考慮到色譜柱壽命,推薦使用過程中固定為其中一種模式。另外,因色譜柱出廠時使用 50%乙腈封存,所以如計劃使用正相模式,請先使用異丙醇等將柱內(nèi)的溶劑進行充分置換(置換時,建議高壓力不過15Mpa,故請根據(jù)壓力調(diào)整流速)。
4.色譜柱的清洗(一般方法)
? 當流動相中不含緩沖液或鹽類物質(zhì)時,可直接提高流動相中的有機溶劑的濃度來清洗柱內(nèi)殘留的強保留物質(zhì)??墒褂玫挠袡C溶劑至100。特別是脂溶性較高的成分被吸附在柱內(nèi)的情況,添加 THF 有時可以取得較好的清洗效果。
? 對于洗脫液中含有緩沖液或鹽的情況, 先用不含此類物質(zhì)的水/有機溶劑混合液 (與洗脫液同等配比) 置換后,再按與上述同樣的方式進行清洗。
? 在 pH 值臨界點附近使用后,如只用水清洗,可能會引起色譜柱的劣化。請使用前面所提到的水/有機溶劑混合液(與洗脫液同等配比)進行通液清洗。
? 由于蛋白質(zhì)或多糖類等高分子化合物附著在柱內(nèi),一般很難清洗去除。如使用含有此類物質(zhì)或雜質(zhì)較多的樣品進行分離時,推薦使用固相萃取(SPE)等對樣品進行前處理或使用保護柱。
YMC-Pack CN
? 對使用非水性流動相進行正相分離的CN 柱,當推測有極性成分吸附于柱內(nèi)時,可用異丙醇等來進行清洗。
5.其他
? 3um 的分析柱,柱長為150mm, 250mm,耐壓上限均為25 MPa;柱長<150mm 時,壓力上限為20MPa。
5um 的分析柱,柱長≤150mm 時,壓力上限為20MPa;柱長=250mm 時,壓力上限為25MPa。內(nèi)徑≥10mm 的半制備,一般建議在10MPa 以內(nèi)使用,使用過此壓力時建議調(diào)低流速。如需用耐更高壓力的半制備柱請來電垂詢。
? 如重復進樣時發(fā)現(xiàn)柱壓升高,請使用 YMC Duo-filter 對樣品進行預處理過濾。另外對易造成篩板堵塞的樣品請使用在線過濾器(XRPRCS02)。
? 色譜柱的使用溫度上限為50℃,但由于流動相的pH 值等因素會影響到色譜柱的壽命,所以通常情況下建議在20℃~ 40℃之間使用。